1.溶液配制完,平衡一下很重要。
很多新晉研發(fā)人員做實(shí)驗(yàn)并無(wú)規(guī)劃,對(duì)于溶液總喜歡現(xiàn)用現(xiàn)配,對(duì)于簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)鹽緩沖液倒是還好,對(duì)于成分相對(duì)復(fù)雜的緩沖液,建議還是提前一天配制,讓各個(gè)組分平衡一段時(shí)間更保險(xiǎn)。
我舉個(gè)例子,配制校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的時(shí)候,有時(shí)候我們有時(shí)發(fā)現(xiàn),剛配制完即時(shí)測(cè)量,與2-8℃平衡一段時(shí)間再去測(cè)量,尤其對(duì)于低濃度點(diǎn)的測(cè)量值,兩者之間可能存在顯著差異。包括對(duì)于凍干品的制備,我個(gè)人也都是習(xí)慣先把校準(zhǔn)品配制完放置一段時(shí)間,讓校準(zhǔn)物質(zhì)跟緩沖液有一個(gè)充分的平衡過(guò)程,然后再去凍干,這對(duì)于復(fù)溶后的穩(wěn)定性,以及瓶間差異性都有更優(yōu)的控制。
2.PC-300除了是防腐劑,也是一個(gè)消泡劑。
我們?cè)谂渲坪?span id="ymliixpze8nw" class="">BSA,酪蛋白或者含有吐溫20這類(lèi)溶液的時(shí)候,很多同仁為了加速溶解,攪拌地特別劇烈,導(dǎo)致泡沫起了一大堆,特別難以消除。
建議大家PC-300先不要和其他組分事先一起加進(jìn)去,可以等其他組分溶解地差不多的時(shí)候再行加入,你會(huì)發(fā)現(xiàn)它對(duì)于泡沫的消除非常有效,同時(shí)它還有助于某些組分的后期溶解。
3.溶液配制完,過(guò)濾一下更優(yōu)。
之前有個(gè)做免疫層析的同事,發(fā)現(xiàn)把偶聯(lián)和封閉用的溶液,經(jīng)0.45um的濾膜過(guò)濾以后,膠體金的死金以及乳膠微球的聚集問(wèn)題都有一定程度地降低。后來(lái)我把針頭過(guò)濾器掰開(kāi),在濾膜上發(fā)現(xiàn)了較多的黑色不溶性顆粒,甚至還一些細(xì)小的毛發(fā)。就像晶體的形成需要母核一樣,很多問(wèn)題的發(fā)生都依附于細(xì)不可見(jiàn)的微小雜質(zhì)。
4.實(shí)驗(yàn)室的溶液配方需要統(tǒng)一,試劑的更換需要第一時(shí)間知曉。
我們很多時(shí)候容易犯懶,通用試劑用完,一般先看看別人有沒(méi)有類(lèi)似的溶液,然后蹭用。這導(dǎo)致了很多實(shí)驗(yàn)在某個(gè)時(shí)間結(jié)點(diǎn)做的很好,之后就永遠(yuǎn)也重復(fù)不出來(lái)了,而且無(wú)法追溯。所以實(shí)驗(yàn)室統(tǒng)一通用溶液配方很重要,如果有條件,甚至配液的人也可以固定為某一個(gè)人。
另外,生化試劑更換新批次或者新廠家,相關(guān)人員要及時(shí)通知到每個(gè)人,包括但不局限于抗原抗體、BSA、酪蛋白、吐溫20、Triton×100、EDC、NHS等各種常見(jiàn)試劑,甚至包括Tris、磷酸鹽、硼酸、蔗糖這種無(wú)機(jī)試劑。很多物料的更換,都需要帶來(lái)工藝的微調(diào)整,研發(fā)人員對(duì)此需要有心理準(zhǔn)備,無(wú)需詫異。
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